En verden en kamp
─ International samarbejde om at opbygge et globalt samfund af fælles skæbne, der reagerer på Covid-19 pandemisk udfordring
Den nye coronavirus, der fejer over hele verden, har resulteret i en igangværende global covid-19 pandemisk krise. Den nye Coronavirus har ingen grænser, intet land vil blive skånet fra denne kamp mod Covid-19. Som svar på denne verdensomspændende Covid-19-pandemi yder Liming Bio-Products Corp bidrag til at støtte velbefindende i vores globale samfund.
Vores verden står i øjeblikket over for den hidtil uset påvirkning af den nye Coronavirus Disease 2019 (Covid-19) Pandemic. Til dato er der ikke noget effektivt lægemiddel til rådighed til behandling af denne sygdom. Imidlertid er der udviklet mange diagnostiske tests til påvisning af COVID-19. Disse tests er baseret på molekylære eller serologiske metoder til at detektere den nye coronavirus -specifikke nukleinsyre eller antistofbiomarkører. Da Covid-19 har nået en pandemisk status, er tidlig diagnose af den nye coronavirus-infektion kritisk til vurdering af spredningen af virussen og indeholdende den, men en perfekt test til universel brug findes endnu ikke. Vi må vide, hvilke tests der potentielt kunne bruges til screening, diagnose og overvågning af Covid-19-infektionen, og hvad er deres begrænsninger. Det er meget vigtigt, hvordan man bedre udnytter disse videnskabelige værktøjer bedre og hjælper med at identificere og kontrollere fremkomsten af denne hurtigt spredte og alvorlige sygdom.
Formålet med påvisning af den nye coronavirus er at afgøre, om en person, der har covid-19-infektion eller en asymptotisk bærer, der kan sprede virussen lydløst, for at give væsentlig information til at vejlede beslutningstagning til klinisk behandling. Tidligere undersøgelser har vist, at 70% af kliniske beslutninger afhænger af testresultaterne. Når der anvendes forskellige detektionsmetoder, er kravene til detektionsreagenssæt også forskellige.
Figur 1
Figur 1:Diagram, der viser de vigtigste stadier af generelle biomarkørniveauer i det typiske tidsforløb for Covid-19-infektion. X-aksen angiver antallet af infektionsdage, og Y-aksen indikerer den virale belastning, koncentration af antigener og koncentration af antistoffer i forskellige perioder. Antistof refererer til IgM- og IgG -antistoffer. Både RT-PCR og antigendetektion bruges til at detektere tilstedeværelsen eller fraværet af ny coronavirus, som er direkte bevis for tidlig patientdetektion. Inden for en uge efter virusinfektion foretrækkes PCR -detektion eller antigendetektion. Efter den nye coronavirus -infektion i cirka 7 dage er IgM -antistoffet mod den nye coronavirus gradvist steget i patientens blod, men eksistensens varighed er kort, og dets koncentration falder hurtigt. I modsætning hertil vises IgG -antistoffet mod virussen senere, normalt ca. 14 dage efter virusinfektionen. IgG -koncentrationen øges gradvist, og den fortsætter en lang periode i blodet. Så hvis IgM detekteres i patientens blod, betyder det, at virussen for nylig har inficeret, hvilket er en tidlig infektionsmarkør. Når IgG -antistoffet påvises i patientens blod, betyder det, at den virale infektion har været i nogen tid. Det kaldes også sen infektion eller tidligere infektion. Det ses ofte hos patienter, der er i gendannelsesfasen.
Biomarkørerne for ny Coronavirus
Den nye coronavirus er en RNA -virus, der er sammensat af proteiner og nukleinsyrer. Virussen invaderer værten (human) krop, går ind i celler gennem bindingsstedet tilsvarende receptor ACE2 og replikerer i værtsceller, hvilket får det humane immunsystem til at reagere på fremmede indtrængende og producere specifikke antistoffer. Derfor kan hætteglas nukleinsyrer og antigener og specifikke antistoffer mod nye coronavirus teoretisk anvendes som specifikke biomarkører til påvisning af den nye coronavirus. Til detektion af nukleinsyre er RT-PCR-teknologi de mest anvendte, mens serologiske metoder ofte anvendes til påvisning af de nye coronavirus-specifikke antistoffer. I øjeblikket er der en række testmetoder tilgængelige, som vi kan vælge til test af Covid-19-infektion [1].
Grundlæggende principper for hovedtestmetoder til nye coronavirus
Mange diagnostiske tests for COVID_19 er hidtil tilgængelige, med flere testsæt, der modtager godkendelse under en godkendelsesgodkendelse hver dag. Selvom den nye testudvikling, der kommer ud med så mange forskellige navne og formater, er alle de nuværende COVID_19-test dybest set afhængige af to hovedteknologier: nukleinsyretektion for det virale RNA og serologiske immunoassays, der detekterer virale specifikke antistoffer (IGM og IGG).
01. Nukleinsyretektion
Omvendt transkription-polymerase-kædereaktion (RT-PCR), LOOP-medieret isotermisk amplifikation (LAMP) og næste generations sekventering (NGS) er de almindelige nukleinsyremetoder til påvisning af nye coronavirus RNA. RT-PCR er den første type test for Covid-19, anbefalet af både Verdenssundhedsorganisationen (WHO) og US Center for Disease Control and Prevention (CDC).
02.Serologisk antistofdetektion
Antistof er et beskyttende protein produceret i menneskelig krop som respons på virusinfektionen. IgM er en tidlig type antistof, hvorimod IgG er et senere antistof af typen. Serum- eller plasmaprøven undersøges normalt for tilstedeværelsen af specifikke IgM- og IgG-typer af antistoffet til vurdering af akutte og rekonvalesente faser af Covid-19-infektion. Disse antistofbaserede detektionsmetoder inkluderer kolloidalt guldimmunokromatografiassay, latex eller fluorescerende mikrosfæreimmunokromatografi, enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) og kemiluminescensassay.
03.Viral antigendetektion
Antigen er en struktur på virussen, der er genkendt af den menneskelige krop, der udløser immunforsvarssystemet til at producere antistoffer for at rydde virussen fra blod og væv. Et viralt antigen, der er til stede på virussen, kan målrettes og detekteres ved anvendelse af immunoassay. Ligesom viralt RNA er virale antigener også til stede i luftvejene hos inficerede individer og kan bruges til at diagnosticere akut fase af Covid-19-infektionen. Derfor anbefales det ofte at indsamle øvre luftvejsprøver, såsom spyt, nasopharyngeal og oropharyngeal pinde, dyb hoste sputum, bronchoalveolær skylningsvæske (BALF) til indledende antigenforsøg.
Valg af testmetoder til nye coronavirus
Valg af en testmetode involverer mange faktorer, herunder klinisk indstilling, test af kvalitetskontrol, omdrejningstid, testomkostninger, prøveudtagningsmetoder, tekniske krav til laboratoriepersonale, krav til facilitet og udstyr. Påvisningen af nukleinsyrer eller virale antigener er at tilvejebringe direkte bevis for tilstedeværelsen af viraerne og bekræfte diagnosen af ny coronavirus -infektion. Selvom der er mange metoder til antigendetektion, er deres detektionsfølsomhed for den nye coronavirus teoretisk lavere end for RT-PCR-amplifikationen. Antistofprøvning er påvisning af anti-virus-antistoffer produceret i den menneskelige krop, som hænger i tide og ofte ikke kan bruges til tidlig påvisning i den akutte fase af virusinfektion. Den kliniske indstilling til detektionsapplikationer kan variere, og prøvesamlingsstederne kan også være forskellige. Til påvisning af virale nukleinsyrer og antigener skal prøven opsamles i luftvejene, hvor virussen er til stede, såsom nasopharyngeal swabs, oropharyngeal swabs, sputum eller bronchoalveolær lavagevæske (BALF). For antistofbaseret detektion skal blodprøven opsamles og undersøges for tilstedeværelsen af specifikt anti-virus-antistof (IgM/IgG). Imidlertid kan antistof- og nukleinsyretestresultater supplere hinanden. For eksempel, når testresultatet er den nukleinsyre-negative, IgM-negative, men IgG-positive, indikerer disse resultater, at patienten ikke i øjeblikket bærer virussen, men er blevet udvundet fra den nye coronavirus-infektion. [2]
Fordele og ulemper ved nye coronavirus -tests
I diagnosen og behandlingsprotokollen for ny Coronavirus lungebetændelse (forsøgsversion7) (frigivet af National Health Commission & State Administration of Traditional Chinese Medicine den 3. marts 2020) bruges nukleinsyretest som guldstandardmetoden til diagnose af romanen Coronavirus -infektion, mens antistofprøvning også betragtes som en af bekræftelsesmetoderne til diagnosen.
Patogene og serologiske fund
(1) Patogene fund: Nye coronavirus-nukleinsyre kan påvises i nasopharyngeal swabs, sputum, lavere luftvejssekretions, blod, fæces og andre prøver ved hjælp af RT-PCRAND/eller NGS-metoder. Det er mere nøjagtigt, hvis prøver opnås fra nedre luftvej (sputum- eller luftkanalekstraktion). Prøverne skal indsendes til test så hurtigt som muligt efter indsamling.
(2) serologiske fund: NCP-virusspecifik IgM bliver detekterbar omkring 3-5 dage efter begyndelsen; IgG når en titrering af mindst 4 gange stigning under rekonvalescens sammenlignet med den akutte fase.
Valg af testmetoder afhænger imidlertid af geografiske placeringer, medicinske regler og kliniske omgivelser. I USA udstedte NIH Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) behandlingsretningslinjer (Site Opdateret: 21. april 2020) og FDA udstedte politik for diagnostiske test for Coronavirus Disease-2019 under den offentlige sundheds nød (udstedt den 16. marts2020 ), hvor serologisk testning af IgM/IgG -antistoffer kun valgte som en screeningstest.
Nukleinsyretektionsmetode
RT_PCR er en meget følsom nukleinsyretest designet til at detektere, om den nye coronavirus RNA er til stede i respiratoriet eller andre prøver. Et positivt PCR-testresultat betyder tilstedeværelsen af nye coronavirus-RNA i prøven for at bekræfte COVID-19-infektionen. Et negativt PCR -testresultat betyder ikke fraværet af virusinfektionen, fordi den kunne påvirkes af dårlig prøvekvalitet eller sygdomspunkter i den udvundne fase osv. Selvom RT-PCR er en meget følsom test, har den flere ulemper. RT-PCR-test kan være arbejdskrævende og tidskrævende, afgørende afhængig af prøvens høje kvalitet. Dette kan være en udfordring, fordi mængden af viralt RNA ikke kun varierer enormt mellem forskellige patienter, men også kan variere inden for den samme patient afhængigt af tidspunkterne, når prøven indsamles såvel som infektionsfaser eller begyndelsen af kliniske symptomer. Detektering af den nye coronavirus kræver prøver af høj kvalitet, der indeholder en tilstrækkelig mængde intakt viralt RNA.
RT-PCR-testen kan give et forkert negativt resultat (falskt negativt) for nogle patienter, der har Covid-19-infektion. Som vi ved, er de vigtigste infektionssteder for den nye coronavirus placeret ved lungen og den nedre luftvej, såsom alveoli og bronchi. Derfor anses sputumprøven fra en dyb hoste eller den bronchoalveolære skyllevæske (BALF) for at have den højeste følsomhed til viral detektion. I klinisk praksis indsamles der imidlertid ofte prøver fra den øvre luftvej ved anvendelse af nasopharyngeal eller oropharyngeal pinde. Indsamling af disse prøver er ikke kun ubehageligt for patienter, men kræver også specielt uddannet personale. For at gøre prøveudtagning mindre invasiv eller lettere kan patienterne i nogle tilfælde få en oral pind og give dem mulighed for at tage en prøve fra den bukkale slimhinde eller tunge, der swabbing selv. Uden tilstrækkelig viralt RNA kan RT-qPCR returnere et falsk-negativt testresultat. I Hubei-provinsen, Kina, RT-PCR-følsomhed i den indledende detektion blev kun rapporteret ca. 30%-50%med et gennemsnit på 40%. Den høje frekvens af falsk-negativ var sandsynligvis forårsaget af utilstrækkelig prøveudtagning.
Derudover kræver RT-PCR-testen højtuddannet personale til at udføre komplekse RNA-ekstraktionstrin og PCR-amplifikationsprocedure. Det kræver også et højere niveau af beskyttelse af biosikkerhed, speciel laboratoriefacilitet og PCR-instrument i realtid. I Kina skal RT-PCR-testen for detektion af Covid-19 udføres i biosikkerhedsniveau 2-laboratorier (BSL-2), med personalebeskyttelse ved hjælp af biosikkerhedsniveau 3 (BSL-3) praksis. I henhold til disse krav, fra begyndelsen af januar til begyndelsen af februar 2020, var kapaciteten i Kina Wuhans CDC -laboratorium kun i stand til at opdage et par hundrede sager om dagen. Normalt ville dette ikke være et problem, når man tester andre infektionssygdomme. Når man beskæftiger sig med en global pandemi som Covid-19 med potentielt millioner af mennesker, der skal testes, bliver RT-PCR imidlertid et kritisk problem på grund af dets krav til særlige laboratoriefaciliteter eller teknisk udstyr. Disse ulemper kan begrænse RT-PCR, der skal bruges som et effektivt værktøj til screening, og kan også føre til forsinkelser i rapporterne om testresultater.
Serologisk antistofdetektionsmetode
Med fremskridt med sygdomsforløbet, især i midten og sene stadier, er antistofdetektionshastigheden meget høj. En undersøgelse i Wuhan Central South Hospital viste, at antistofdetektionsgraden kunne nå mere end 90% i den tredje uge af Covid-19-infektion. Antistoffet er også produktet af den menneskelige immunrespons mod den nye coronavirus. Antistofprøven giver adskillige fordele i forhold til RT-PCR. For det første tester de serologiske antistof enkle og hurtige. Antistof laterale strømningstest kan bruges til plejepunkt for at levere et resultat på 15 minutter. For det andet er det mål, der detekteres ved den serologiske test, antistoffet, som vides at være meget mere stabilt end viralt RNA. Under indsamling, transport, opbevaring og test er prøverne til antistofforsøg generelt mere stabile end prøverne for RT-PCR. For det tredje, fordi antistoffet er jævnt fordelt i blodcirkulationen, er der mindre prøveudtagningsvariation sammenlignet med nukleinsyretesten. Prøvevolumen, der kræves til antistofprøven, er relativt lille. For eksempel er 10 mikroliter af fingerprikblod tilstrækkelig til anvendelse i antistoffet lateral flow-test.
Generelt vælges antistofprøven som et supplementværktøj til detektion af nukleinsyrer for at forbedre detektionshastigheden for den nye coronavirus under sygdomskurserne. Når antistofprøven anvendes sammen med en nukleinsyretest, kan det øge assay-nøjagtigheden til diagnose af COVID19 ved at reducere potentielle falsk-positive og falske-negative resultater. Den aktuelle operationsvejledning anbefaler ikke at bruge to typer test separat som et uafhængigt detektionsformat, men bør bruges som et kombineret format. [2]
Figur2:Den korrekte fortolkning af nukleinsyre- og antistoftestresultater til påvisning af ny coronavirus -infektion
Figur 3:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Novel Coronavirus IgM/IgG Antistof Dual Rapid Test Kit (StrongStep®SARS-CoV-2 IgM/IgG Antistof Rapid Test, lateximmunokromatografi)
Figur 4:Liming Bio-Products Co., Ltd.-StrongStep®Novel coronavirus (SARS-CoV-2) multiplex realtid PCR-kit (detektion for tre gener, fluorescerende sonde-metode).
Note:Dette meget følsomme, klar til brug PCR-kit fås i lyofiliseret format (frysetørringsproces) til langtidsopbevaring. Sættet kan transporteres og opbevares ved stuetemperatur og er stabilt i et år. Hvert rør af forblandet indeholder alle de reagenser, der er nødvendige til PCR-amplifikation, inklusive omvendt-transkriptase, TAQ-polymerase, primere, sonder og DNTP'er. på et PCR -instrument til at køre amplifikationen.
Som svar på det nye Coronavirus-udbrud har Liming Bio-Products Co., Ltd. arbejdet hurtigt for at udvikle to diagnostiske sæt for at gøre det muligt for kliniske og folkesundhedslaboratorier hurtigt at diagnosticere Covid-19-infektion. Disse sæt er meget velegnede til brug til storstilet screening i lande og regioner, hvor det nye coronavirus-udbrud hurtigt spreder sig, og til at give diagnose og bekræftelse af Covid-19-infektion. Disse sæt er kun til brug under forudmærket nødsituationsgodkendelse (PEUA). Testning er begrænset til laboratorier, der er certificeret i henhold til de nationale eller lokale myndigheder.
Antigendetekteringsmetode
1. Viral antigendetektion klassificeres i samme kategori af direkte detektion som nukleinsyretektion. Disse direkte detektionsmetoder ser efter bevis for virale patogener i prøven og kan anvendes til bekræftelsesdiagnose. Udviklingen af antigendetektionssæt kræver imidlertid høj kvalitet af monoklonale antistoffer med stærk affinitet og høj følsomhed, der er i stand til at genkende og fange patogene vira. Det tager normalt mere end seks måneder at vælge og optimere et monoklonalt antistof, der er egnet til brug til fremstilling af antigendetektionssættet.
2. I øjeblikket er reagenterne til direkte påvisning af den nye coronavirus stadig under forsknings- og udviklingsstadium. Derfor er intet antigendetektionskit klinisk valideret og kommercielt tilgængeligt. Selvom det tidligere blev rapporteret, at et diagnostisk firma i Shenzhen har udviklet et antigendetektionssæt og klinisk testet i Spanien, kunne assay -pålideligheden og nøjagtigheden ikke valideres på grund af tilstedeværelsen af reagenskvalitetsproblemer. Indtil videre har NMPA (tidligere Kina FDA) ikke godkendt noget antigendetektionssæt til klinisk brug endnu. Afslutningsvis er der udviklet en række detektionsmetoder. Hver metode har sine fordele og begrænsninger. Resultaterne fra forskellige metoder kan bruges til verifikation og komplement.
3. Produktion af en Test Kit af høj kvalitet afhænger stærkt af optimering under forskning og udvikling. Liming Bio-Product Co., Ltd. Testsæt kræves for at opfylde strenge fremstillings- og kvalitetskontrolstandarder for at sikre, at de giver de højeste niveauer af ydeevne og konsistens. Forskerne ved Liming Bio-Product Co., Ltd. har over tyve års erfaring med at designe, teste og optimere in vitro-diagnostiske sæt for at sikre det højeste niveau af ydeevne i analytisk kvantificering.
Under den covid-19-pandemi stod den kinesiske regering over for stigning i den enorme efterspørgsel efter epidemiske forebyggelsesmaterialer i de internationale hotspots. Den 5. april, på pressekonferencen i statsrådet, led forebyggelse og kontrolmekanisme "styrkelse af kvalitetsstyring af medicinske materialer og regulering af markedets rækkefølge", Jiang Fan, en første niveauinspektør for udenrigshandelsafdelingen i ministeriet Of Commerce, sagde: "Dernæst vil vi først fokusere vores bestræbelser på to aspekter for at fremskynde støtte fra mere medicinske forsyninger, der er nødvendige af det internationale samfund, og også for at forbedre kvalitetskontrol, regulering og styring af produkterne. Vi vil give Kinas bidrag til i fællesskab at reagere på den globale epidemi og opbygge et samfund med en fælles fremtid for menneskeheden.
Figur 5:Liming Bio-Products Co., Ltd.s nye Coronavirus-reagens har opnået EU's registreringscertifikat
Ærescertifikatet
Houshenshan
Figur 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. støttede Wuhan Vulcan (Houshenshan) Mountain Hospital for at kæmpe mod Covid-19-epidemien og blev tildelt ærescertifikatet fra Wuhan Røde Kors. Wuhan Vulcan Mountain Hospital er det mest berømte hospital i Kina, der er specialiseret i behandling af svær covid - 19 patienter.
Idet det nye Coronavirus-udbrud fortsætter med at sprede sig rundt i verden, træder Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. op for at støtte og hjælpe samfund over hele verden med vores innovative teknologier til at bekæmpe denne hidtil uset globale trussel. Hurtig test af Covid-19-infektion er en kritisk del af adresseringen af denne trussel. Vi fortsætter med at bidrage på en betydelig måde ved at give diagnostiske platforme af høj kvalitet i hænderne på frontlinjesundhedsarbejdere, så folk kan modtage de kritiske testresultater, de har brug for. Liming Bio-Products Co., Ltd.'s bestræbelser i kampen mod Covid-19-pandemi er at bidrage med vores teknologier, oplevelser og ekspertise til internationale samfund til opførelse af et globalt samfunds samfund.
Lang presse ~ scan og følg os
E -mail: sales@limingbio.com
Hjemmeside: https://limingbio.com
Posttid: Maj-01-2020
