Én verden én kamp
─Internationalt samarbejde for at opbygge et globalt fællesskab med fælles skæbne, der reagerer på COVID-19-pandemiudfordringen
Den nye coronavirus, der fejer over hele verden, har resulteret i en igangværende global COVID-19-pandemi-krise.Den nye coronavirus har ingen grænser, intet land vil blive skånet fra denne kamp mod COVID-19.Som reaktion på denne verdensomspændende COVID-19-pandemi yder Liming Bio-Products Corp bidrag til at støtte vores globale samfunds velfærd.
Vores verden står i øjeblikket over for den hidtil usete virkning af den nye coronavirus sygdom 2019 (COVID-19) pandemi.Til dato er der ikke noget effektivt lægemiddel tilgængeligt til behandling af denne sygdom.Der er dog udviklet mange diagnostiske tests til påvisning af COVID-19.Disse tests er baseret på molekylære eller serologiske metoder til at påvise de nye coronavirus-specifikke nukleinsyre- eller antistofbiomarkører.Da COVID-19 har nået en pandemisk status, er tidlig diagnose af den nye coronavirusinfektion afgørende for at vurdere spredningen af virussen og indeholde den, men en perfekt test til universel brug eksisterer endnu ikke.Vi er nødt til at vide, hvilke tests der potentielt kan bruges til screening, diagnosticering og overvågning af COVID-19-infektionen, og hvad er deres begrænsninger.Det er meget vigtigt, hvordan man gør bedre brug af disse videnskabelige værktøjer og hjælper med at identificere og kontrollere fremkomsten af denne hurtigt spredte og alvorlige sygdom.
Formålet med påvisningen af den nye coronavirus er at afgøre, om en person, der har COVID-19-infektion, eller en asymptotisk bærer, der kan sprede virussen lydløst, for at give væsentlig information til at vejlede beslutningstagningen for klinisk behandling.Tidligere undersøgelser har vist, at 70 % af de kliniske beslutninger afhænger af testresultaterne.Når der anvendes forskellige detektionsmetoder, er kravene til detektionsreagenssættene også forskellige.
figur 1
Figur 1:Diagram, der viser de vigtigste stadier af generelle biomarkørniveauer under det typiske tidsforløb for COVID-19-infektion.X-aksen angiver antallet af dage med infektion, og Y-aksen angiver virusmængden, koncentrationen af antigener og koncentrationen af antistoffer i forskellige perioder.Antistof refererer til IgM- og IgG-antistoffer.Både RT-PCR og antigendetektion bruges til at detektere tilstedeværelsen eller fraværet af ny coronavirus, hvilket er direkte bevis for tidlig patientdetektion.Inden for en uge efter virusinfektion foretrækkes PCR-detektion eller antigenpåvisning.Efter den nye coronavirusinfektion i omkring 7 dage er IgM-antistoffet mod det nye coronavirus gradvist steget i patientens blod, men varigheden af eksistensen er kort, og dets koncentration falder hurtigt.I modsætning hertil dukker IgG-antistoffet mod virussen op senere, normalt omkring 14 dage efter virusinfektionen.IgG-koncentrationen stiger gradvist, og den varer i en længere periode i blodet.Hvis IgM'et påvises i patientens blod, betyder det således, at virussen for nylig er inficeret, hvilket er en tidlig infektionsmarkør.Når IgG-antistoffet påvises i patientens blod, betyder det, at virusinfektionen har været det i nogen tid.Det kaldes også sen infektion eller tidligere infektion.Det ses ofte hos patienter, der er i bedringsfasen.
Biomarkørerne for ny coronavirus
Det nye coronavirus er et RNA-virus, som er sammensat af proteiner og nukleinsyrer.Virusset invaderer værtens (menneskelige) krop, trænger ind i cellerne gennem bindingsstedets tilsvarende receptor ACE2 og replikerer i værtsceller, hvilket får det menneskelige immunsystem til at reagere på fremmede angribere og producere specifikke antistoffer.Derfor kan hætteglassets nukleinsyrer og antigener og specifikke antistoffer mod ny coronavirus teoretisk bruges som specifikke biomarkører til påvisning af den nye coronavirus.Til nukleinsyrepåvisning er RT-PCR-teknologi den mest anvendte, mens serologiske metoder almindeligvis anvendes til påvisning af de nye coronavirus-specifikke antistoffer.I øjeblikket er der en række forskellige testmetoder tilgængelige, som vi kan vælge til at teste COVID-19-infektion [1].
Grundlæggende principper for de vigtigste testmetoder for ny coronavirus
Mange diagnostiske tests for COVID_19 er tilgængelige indtil videre, med flere testsæt, der modtager godkendelse under en nødbrugstilladelse hver dag.Selvom de nye testudviklinger kommer ud med så mange forskellige navne og formater, er alle de nuværende COVID_19-tests dybest set afhængige af to hovedteknologier: nukleinsyredetektion for det virale RNA og serologiske immunoassays, der detekterer virusspecifikke antistoffer (IgM og IgG).
01. Nukleinsyrepåvisning
Omvendt transkription-polymerasekædereaktion (RT-PCR), loop-medieret isotermisk amplifikation (LAMP) og næste generations sekventering (NGS) er de almindelige nukleinsyremetoder til påvisning af nyt coronavirus RNA.RT-PCR er den første type test for COVID-19, anbefalet af både Verdenssundhedsorganisationen (WHO) og US Center for Disease Control and Prevention (CDC).
02.Serologisk antistofpåvisning
Antistof er et beskyttende protein, der produceres i menneskekroppen som reaktion på virusinfektionen.IgM er en tidlig type antistof, mens IgG er et senere type antistof.Serum- eller plasmaprøven undersøges normalt for tilstedeværelsen af specifikke IgM- og IgG-typer af antistoffet til vurdering af akutte og rekonvalescente faser af COVID-19-infektion.Disse antistof-baserede detektionsmetoder omfatter kolloid guld-immunokromatografi assay, latex eller fluorescerende mikrosfære immunochromatografi, enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) og kemiluminescens assay.
03.Viral antigen påvisning
Antigen er en struktur på virussen, der genkendes af den menneskelige krop, og som udløser immunforsvaret til at producere antistoffer for at fjerne virussen fra blod og væv.Et viralt antigen, der er til stede på virussen, kan målrettes og detekteres ved hjælp af immunoassay.Ligesom viralt RNA er virale antigener også til stede i luftvejene hos inficerede individer og kan bruges til at diagnosticere den akutte fase af COVID-19-infektionen.Derfor anbefales det ofte at indsamle prøver fra øvre luftveje, såsom spyt, nasopharyngeale og oropharyngeale podninger, dyb hosteopspyt, bronchoalveolær skyllevæske (BALF) til indledende antigentest.
Valg af testmetoder for ny coronavirus
Valg af testmetode involverer mange faktorer, herunder kliniske omgivelser, testkvalitetskontrol, ekspeditionstid, testomkostninger, prøveudtagningsmetoder, tekniske krav til laboratoriepersonale, krav til faciliteter og udstyr.Påvisningen af nukleinsyrer eller virale antigener skal give direkte beviser for tilstedeværelsen af vira og bekræfte diagnosen ny coronavirusinfektion.Selvom der er mange metoder til antigenpåvisning, er deres påvisningsfølsomhed af det nye coronavirus teoretisk lavere end for RT-PCR-amplifikationen.Antistoftestning er påvisning af anti-virus antistoffer produceret i den menneskelige krop, som halter i tid og ofte ikke kan bruges til tidlig påvisning i den akutte fase af virusinfektion.De kliniske rammer for detektionsapplikationer kan variere, og prøveindsamlingsstederne kan også være forskellige.Til påvisning af virale nukleinsyrer og antigener skal prøven opsamles i luftvejene, hvor virus er til stede, såsom nasopharyngeale podninger, oropharyngeale podninger, sputum eller bronchoalveolær skyllevæske (BALF).For antistof-baseret påvisning skal blodprøver tages og undersøges for tilstedeværelsen af specifikt anti-virus antistof (IgM/IgG).Antistof- og nukleinsyretestresultater kan dog komplementere hinanden.For eksempel, når testresultatet er nukleinsyre-negative, IgM-negative, men IgG-positive, indikerer disse resultater, at patienten i øjeblikket ikke bærer virussen, men er blevet genoprettet fra den nye coronavirus-infektion.[2]
Fordele og ulemper ved nye coronavirus-tests
I diagnose- og behandlingsprotokollen for ny coronavirus-lungebetændelse (forsøgsversion 7) (udgivet af National Health Commission & State Administration of Traditional Chinese Medicine den 3. marts 2020) bruges nukleinsyretestning som guldstandardmetoden til diagnosticering af romanen coronavirus-infektion, mens antistoftestning også betragtes som en af bekræftelsesmetoderne til diagnosen.
Patogene og serologiske fund
(1) Patogene fund: Ny coronavirus-nukleinsyre kan påvises i nasopharyngeale podninger, sputum, sekreter fra de nedre luftveje, blod, fæces og andre prøver ved hjælp af RT-PCR og/eller NGS-metoder.Det er mere nøjagtigt, hvis prøver er taget fra de nedre luftveje (sputum eller luftvejsekstraktion).Prøverne skal indsendes til test så hurtigt som muligt efter indsamling.
(2) Serologiske fund: NCP-virusspecifik IgM bliver påviselig omkring 3-5 dage efter debut;IgG når en titrering på mindst 4 gange stigning under rekonvalescens sammenlignet med den akutte fase.
Valget af testmetoder afhænger dog af geografiske placeringer, medicinske regler og kliniske omgivelser.I USA udstedte NIH behandlingsretningslinjer for Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) (websted opdateret: 21. april 2020) og FDA udstedte en politik for diagnostiske tests for Coronavirus Disease-2019 under folkesundhedsnødsituationen (udstedt den 16. marts 2020 ), hvor serologisk testning af IgM/IgG-antistofferne kun er valgt som en screeningstest.
Nukleinsyrepåvisningsmetode
RT_PCR er en meget følsom nukleinsyretest designet til at påvise, om det nye coronavirus RNA er til stede i luftvejene eller andre prøver.Et positivt PCR-testresultat betyder tilstedeværelsen af nyt coronavirus-RNA i prøven for at bekræfte COVID-19-infektionen.Et negativt PCR-testresultat betyder ikke fravær af virusinfektionen, fordi den kan blive påvirket af dårlig prøvekvalitet eller sygdomstidspunkt i den genoprettede fase osv.Selvom RT-PCR er en meget følsom test, har den flere ulemper.RT-PCR-tests kan være arbejdskrævende og tidskrævende, afgørende afhængig af prøvens høje kvalitet.Dette kan være en udfordring, fordi mængden af viralt RNA ikke kun varierer enormt mellem forskellige patienter, men også kan variere inden for den samme patient afhængigt af tidspunkterne, hvor prøven er indsamlet, samt infektionsfaserne eller begyndelsen af kliniske symptomer.At opdage det nye coronavirus kræver prøver af høj kvalitet, der indeholder en tilstrækkelig mængde intakt viralt RNA.
RT-PCR-testen kan give et forkert negativt resultat (falsk negativ) for nogle patienter, der har COVID-19-infektion.Som vi ved, er de vigtigste infektionssteder for den nye coronavirus placeret ved lungerne og de nedre luftveje, såsom alveoler og bronkier.Derfor anses sputumprøven fra en dyb hoste eller den bronchoalveolære skyllevæske (BALF) for at have den højeste følsomhed for viruspåvisning.I klinisk praksis indsamles prøver dog ofte fra de øvre luftveje ved at bruge nasopharyngeale eller orofaryngeale podninger.Indsamling af disse prøver er ikke kun ubehageligt for patienter, men kræver også specialuddannet personale.For at gøre prøveudtagningen mindre invasiv eller lettere, kan patienterne i nogle tilfælde få en mundtlig podning og give dem mulighed for at tage en prøve fra mundens slimhinde eller tunge, der poder sig selv.Uden tilstrækkeligt viralt RNA kan RT-qPCR returnere et falsk-negativt testresultat.I Hubei-provinsen, Kina, blev RT-PCR-følsomhed i den indledende påvisning kun rapporteret omkring 30%-50%, med et gennemsnit på 40%.Den høje frekvens af falsk-negative var højst sandsynligt forårsaget af utilstrækkelig prøveudtagning.
Derudover kræver RT-PCR-testen højtuddannet personale til at udføre komplekse RNA-ekstraktionstrin og PCR-amplifikationsprocedure.Det kræver også et højere niveau af biosikkerhedsbeskyttelse, speciel laboratoriefacilitet og real-time PCR-instrument.I Kina skal RT-PCR-testen til COVID-19-detektion udføres i biosikkerhedsniveau 2-laboratorier (BSL-2), med personalebeskyttelse ved brug af biosikkerhedsniveau 3 (BSL-3) praksis.I henhold til disse krav, fra begyndelsen af januar til begyndelsen af februar 2020, var kapaciteten i Kina Wuhans CDC-laboratorium kun i stand til at opdage et par hundrede tilfælde om dagen.Normalt ville dette ikke være et problem, når man tester andre infektionssygdomme.Men når man håndterer en global pandemi som COVID-19 med potentielt millioner af mennesker, der skal testes, bliver RT-PCR et kritisk problem på grund af dets krav til specielle laboratoriefaciliteter eller teknisk udstyr.Disse ulemper kan begrænse RT-PCR til at blive brugt som et effektivt værktøj til screening og kan også føre til forsinkelser i rapporterne om testresultater.
Metode til påvisning af serologisk antistof
Med fremskridt i sygdomsforløbet, især i de midterste og sene stadier, er antistofdetektionshastigheden meget høj.En undersøgelse på Wuhan Central South Hospital viste, at antistofdetektionsraten kunne nå mere end 90% i den tredje uge af COVID-19-infektion.Antistoffet er også produktet af det menneskelige immunrespons mod den nye coronavirus.Antistoftesten giver flere fordele i forhold til RT-PCR.For det første tester det serologiske antistof enkelt og hurtigt.Antistof lateral flow test kan bruges til point-of-care for at levere et resultat på 15 minutter.For det andet er målet påvist af den serologiske test antistoffet, som er kendt for at være meget mere stabilt end viralt RNA.Under indsamling, transport, opbevaring og testning er prøverne til antistoftest generelt mere stabile end prøverne til RT-PCR.For det tredje, fordi antistoffet er jævnt fordelt i blodcirkulationen, er der mindre prøveudtagningsvariation sammenlignet med nukleinsyretesten.Det nødvendige prøvevolumen til antistoftesten er relativt lille.For eksempel er 10 mikroliter fingerstikblod tilstrækkeligt til brug i antistof-lateral flowtesten.
Generelt er antistoftesten valgt som et supplementsværktøj til nukleinsyredetektion for at forbedre detektionshastigheden af det nye coronavirus under sygdomsforløbene.Når antistoftesten bruges sammen med en nukleinsyretest, kan den øge assay-nøjagtigheden til diagnosticering af COVID19 ved at reducere potentielle falsk-positive og falsk-negative resultater.Den aktuelle betjeningsvejledning anbefaler ikke at bruge to typer test separat som et uafhængigt detektionsformat, men bør bruges som et kombineret format.[2]
Figur 2:Den korrekte fortolkning af nukleinsyre- og antistoftestresultater til påvisning af ny coronavirusinfektion
Figur 3:Liming Bio-Products Co., Ltd. – Nyt coronavirus IgM/IgG antistof dobbelt hurtig testkit (StrongStep®SARS-CoV-2 IgM/IgG antistof hurtig test, latex immunokromatografi)
Figur 4:Liming Bio-Products Co., Ltd. – StrongStep®Novel Coronavirus (SARS-CoV-2) Multiplex Real-Time PCR kit (detektion for tre gener, fluorescerende probemetode).
Bemærk:Dette meget følsomme, brugsklare PCR-kit er tilgængeligt i frysetørret format (frysetørringsproces) til langtidsopbevaring.Sættet kan transporteres og opbevares ved stuetemperatur og er holdbart i et år.Hvert rør med præmix indeholder alle de reagenser, der er nødvendige til PCR-amplifikationen, inklusive revers-transkriptase, Taq-polymerase, primere, prober og dNTPs-substrater. Brugere kan ganske enkelt rekonstituere blandingen ved at tilføje PCR-kvalitetsvand sammen med skabelonen og derefter indlæse på et PCR-instrument for at køre amplifikationen.
Som reaktion på det nye coronavirus-udbrud har Liming Bio-Products Co., Ltd. arbejdet hurtigt på at udvikle to diagnostiske kits, der gør det muligt for kliniske og offentlige sundhedslaboratorier hurtigt at diagnosticere COVID-19-infektion.Disse kits er meget velegnede til brug til storstilet screening i lande og regioner, hvor det nye coronavirus-udbrud spreder sig hurtigt, og til at stille diagnose og bekræftelse af COVID-19-infektion.Disse sæt er kun til brug under PEUA (Pre-notified Emergency Use Authorization).Testning er begrænset til laboratorier, der er certificeret i henhold til reglerne fra de nationale eller lokale myndigheder.
Antigenpåvisningsmetode
1. Viral antigenpåvisning er klassificeret i samme kategori af direkte påvisning som nukleinsyrepåvisning.Disse direkte detektionsmetoder leder efter bevis for virale patogener i prøven og kan bruges til bekræftelsesdiagnose.Udviklingen af antigendetektionskit kræver dog høj kvalitet af monoklonale antistoffer med stærk affinitet og høj følsomhed, der er i stand til at genkende og fange patogene vira.Det tager normalt mere end seks måneder at udvælge og optimere et monoklonalt antistof, der er egnet til brug i forberedelsen af antigendetektionskittet.
2. I øjeblikket er reagenserne til direkte påvisning af den nye coronavirus stadig under forsknings- og udviklingsstadie.Derfor er intet antigendetektionskit blevet klinisk valideret og kommercielt tilgængeligt.Selvom det tidligere er blevet rapporteret, at et diagnostisk firma i Shenzhen har udviklet et antigendetektionskit og klinisk testet i Spanien, kunne analysens pålidelighed og nøjagtighed ikke valideres på grund af tilstedeværelsen af reagenskvalitetsproblemer.Til dato har NMPA (tidligere Kina FDA) endnu ikke godkendt noget antigendetektionskit til klinisk brug.Som konklusion er der udviklet en række forskellige detektionsmetoder.Hver metode har sine fordele og begrænsninger.Resultaterne fra forskellige metoder kan bruges til verifikation og komplementering.
3. Fremstilling af et COVID-19-testsæt af høj kvalitet afhænger i høj grad af optimering under forskning og udvikling.Liming Bio-Product Co.,Ltd.testsæt skal opfylde strenge produktions- og kvalitetskontrolstandarder for at sikre, at de giver det højeste niveau af ydeevne og konsistens.Forskerne hos Liming Bio-Product Co., Ltd. har over tyve års erfaring med at designe, teste og optimere in vitro diagnostiske kits for at sikre det højeste niveau af ydeevne inden for analytisk kvantificering.
Under COVID-19-pandemien stod den kinesiske regering over for en stigning i den enorme efterspørgsel efter materialer til forebyggelse af epidemi i de internationale hotspots.Den 5. april, på pressekonferencen for statsrådets fælles forebyggelses- og kontrolmekanisme "Styrkelse af kvalitetsstyringen af medicinske materialer og regulering af markedsordenen", Jiang Fan, en inspektør på første niveau i ministeriets udenrigshandelsafdeling of Commerce, sagde: "Dernæst vil vi fokusere vores indsats på to aspekter, for det første at fremskynde støtten til flere medicinske forsyninger, som det internationale samfund har brug for, og også at forbedre kvalitetskontrol, regulering og styring af produkterne. Vi vil yde Kinas bidrag til i fællesskab at reagere på den globale epidemi og opbygge et samfund med en fælles fremtid for menneskeheden.
Figur 5:Liming Bio-Products Co., Ltd.s nye coronavirus-reagens har opnået EU CE-registreringscertifikatet
Hædersbeviset
Houshenshan
Figur 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. støttede Wuhan Vulcan(HouShenShan) Mountain Hospital til at bekæmpe COVID-19-epidemien og blev tildelt æresbeviset fra Wuhan Røde Kors.Wuhan Vulcan bjerghospitalet er det mest berømte hospital i Kina, der har specialiseret sig i behandling af alvorlige COVID-19 patienter.
Efterhånden som det nye coronavirus-udbrud fortsætter med at sprede sig over hele verden, går Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. op for at støtte og hjælpe samfund over hele verden med vores innovative teknologier til at bekæmpe denne hidtil usete globale trussel.Hurtig test af COVID-19-infektion er en kritisk del af håndteringen af denne trussel.Vi fortsætter med at bidrage på en væsentlig måde ved at levere diagnostiske platforme af høj kvalitet i hænderne på frontline sundhedspersonale, så folk kan modtage de kritiske testresultater, de har brug for.Liming Bio-products Co., Ltd.s indsats i kampen mod COVID-19-pandemien er at bidrage med vores teknologier, erfaringer og ekspertise til internationale samfund for opbygningen af et globalt skæbnefællesskab.
Langt tryk ~Scan og følg os
E-mail: sales@limingbio.com
Hjemmeside: https://limingbio.com
Indlægstid: maj 01-2020
