Hvilken er den bedste metode?
—Test til SARS-COV-2-infektionsdiagnose
For bekræftede COVID-19-tilfælde inkluderer rapporterede de almindelige kliniske symptomer feber, hoste, myalgi eller træthed. Alligevel er disse symptomer ikke unikke træk ved COVID-19, fordi disse symptomer ligner den for anden virusinficeret sygdom, såsom influenza. I øjeblikket er virusnukleinsyre realtid PCR (RT-PCR), CT-billeddannelse og nogle hæmatologiparametre de primære værktøjer til klinisk diagnose af infektionen. Mange laboratorietestsæt er blevet udviklet og brugt til at teste patientprøver til COVID-19 af kinesisk CDC1, US CDC2og andre private virksomheder. IgG/IgM-antistoftest, en serologisk testmetode, er også tilføjet som et diagnostisk kriterium i Kinas opdaterede version af diagnosen og behandlingsretningslinjerne for den nye Coronavirus-sygdom (Covid-19), der blev udstedt den 3. marts1. Virus nukleinsyre RT-PCR-test er stadig den aktuelle standarddiagnostiske metode til diagnose af Covid-19.
StrongStep®Novel Coronavlrus (SARS-CoV-2) Multiplex Real-Time PCR Kit (detektion for tre gener)
Alligevel lider disse realtid PCR-testsæt, der leder efter genetisk materiale af virussen, for eksempel i nasale, orale eller analpinde, af mange begrænsninger:
1) Disse tests har lange omdrejningstider og er komplicerede i drift; De tager generelt i gennemsnit over 2 til 3 timer for at generere resultater.
2) PCR -testene kræver certificerede laboratorier, dyre udstyr og uddannede teknikere til at operere.
3) Der er nogle antal falske negativer til RT-PCR af Covid-19. Det kan på grund af lav SARS-COV-2 viral belastning i den øvre luftvejsprøve (ny coronavirus hovedsageligt inficerer den nedre luftvej, såsom pulmonal alveoli), og testen kan ikke identificere mennesker, der har gennemgået en infektion, gendannet og Ryddet virussen fra deres kroppe.
Forskning af Lirong Zou et al4fandt, at der blev påvist højere virale belastninger kort efter indtræden af symptomer, med højere virale belastninger detekteret i næsen end i halsen og det virale nukleinsyrekødmønster hos patienter, der er inficeret med SARS-cov-2, ligner patienter med influenza med influenza4og forekommer forskellig fra det, der ses hos patienter inficeret med SARS-CoV-2.
Yang Pan et al5Undersøgte serielle prøver (halspind, sputum, urin og afføring) fra to patienter i Beijing og fandt, at de virale belastninger i halspind og sputumprøver toppede sig ca. 5-6 dage efter symptomindtræden, sputumprøver generelt viste højere virale belastninger end Halspindprøver. Der blev ikke påvist noget viralt RNA i urin- eller afføringsprøver fra disse to patienter.
PCR -test giver kun et positivt resultat, når virussen stadig er til stede. Testene kan ikke identificere mennesker, der gennemgik en infektion, gendannede og ryddet virussen fra deres kroppe. I handling var kun ca. 30% -50% positiv for PCR hos patienter med klinisk diagnosticeret ny coronavirus lungebetændelse. Mange nye coronavirus pneumonipatienter kan ikke diagnosticeres på grund af negativ nukleinsyretest, så de kan ikke få den tilsvarende behandling i tide. Fra den første til den sjette udgave af retningslinjerne, der udelukkende stoler på grundlag af diagnosen af nukleinsyretestresultater, hvilket forårsagede klinikere store problemer. De tidligste "fløjter", Dr. Li Wenliang, en øjenlæge ved Wuhan Central Hospital, er død. I løbet af sin levetid havde han tre nukleinsyretest i tilfælde af feber og hoste, og sidste gang han fik PCR -positive resultater.
Efter diskussion fra eksperter blev det besluttet at øge serumtestmetoder som et nyt diagnostisk kriterium. Mens antistofprøver, også kaldet serologiske tests, kan det bekræfte, om nogen blev inficeret, selv efter deres immunsystem har ryddet virussen, der forårsager Covid-19.
StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM Antistof Rapid Test
IgG/IgM-antistofprøve vil hjælpe med at spore på en meget mere populationsbaseret måde, der har haft infektionen, fordi mange tilfælde ser ud til at være spredt fra asymptomatiske patienter, der ikke kan identificeres let. Et par i Singapore, manden testede positivt af PCR, hans kones PCR -testresultat var negativt, men antistofprøvresultaterne viste, at hun havde antistoffer, ligesom hendes mand gjorde.
Serologiske assays skal valideres omhyggeligt for at være sikre på, at de reagerer pålideligt, men kun for antistoffer mod den nye virus. En bekymring var, at ligheden mellem de vira, der forårsager alvorligt akut respiratorisk syndrom og Covid-19, kunne føre til krydsreaktivitet. IgG-IGM udviklet af Xue Feng Wang6blev betragtet som i stand til at blive brugt som en point-of-care-test (POCT), da det kan udføres nær sengen med fingerpindblod. Sættet har følsomhed på 88,66% og specificitet på 90,63%. Der var dog stadig falske positive og falske negative resultater.
I Kinas opdaterede version af diagnosen og behandlingsretningslinjen for den nye coronavirus sygdom (Covid-19)1, bekræftede sager er defineret som mistænkte sager, der opfylder et af følgende kriterier:
(1) respiratoriske kanalprøver, blod- eller afføringsprøver testet positivt for SARS-cov-2 nukleinsyre ved anvendelse af RT-PCR;
(2) genetisk sekventering af virus fra luftvejene, blod- eller afføringsprøverprøver er meget homolog med den kendte SARS-cov-2;
(3) serumroman coronavirus -specifikt IgM -antistof og IgG -antistof var positive;
(4) Serumroman coronavirus-specifikt IgG-antistof ændret fra negativt til positivt eller coronavirus-specifikt IgG-antistof i gendannelsesperioden er 4 gange højere end i den akutte periode.
Diagnose og behandling af Covid-19
| Retningslinier | Pubished | Bekræftede diagnostiske kriterier |
| Version 7 | 3Mar.2020 | ❶ PCR ❷ ngs ❸ Igm+IgG |
| Version 6 | 18. februar 2020 | ❶ PCR ❷ ngs |
Reference
1. Retningslinjer for diagnose og behandling af nye coronavirus lungebetændelse (forsøg version 7, National Health Commission of the People's Republic of China, udstedt til 3.Mar.2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Forskningsbrug KUN RT-PCR-protokol i realtid til identifikation af 2019-NCOV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-tretection-instructions.html
3. Singapore hævder første brug af antistofprøve til at spore coronavirus -infektioner
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-brug-antistof-test-track-coronavirus-infektion
4.SARS-CoV-2 Viral belastning i øvre luftvejsprøver af inficerede patienter februar 19.2020 DOI: 10.1056/NEJMC2001737
5.Viralloads af SARS-CoV-2 i kliniske prøver Lancet Infect Dis 2020 Offentliggjort online 24. februar 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Udvikling og klinisk anvendelse af en hurtig IGM-IgG kombineret antistofprøve til SARS-CoV-2
Infektionsdiagnose Xuefeng Wang Orcid ID: 0000-0001-8854-275X
Posttid: Mar-17-2020
